巴中基因敲除小鼠RNA水平「英瀚斯」

实验动物各种体液、的采集方法

消化液的采集

(一) 唾液

1. 直接抽取法 在急性实验中， 可用吸管直接插入动物口腔或唾液腺导管抽吸唾液，此法非常简单，但从口腔抽吸唾液会有杂质混入。

2. 制造腮腺瘘法 在慢性实验中,收集狗的唾液，要用手术方法将腮腺导管开口移向体外，即以腮腺导管为中心，切成一直径约2～3cm的圆形粘膜片，将此粘膜片，与周围组织分开，穿过皮肤切口引到颊外,将带有导管开口的粘膜片与周围的皮肤缝合,腮腺分泌的唾液就流出颊外。这种方法可以收集到较纯净的唾液。先将动物、固定、局部除毛、消毒皮肤，然后估计好皮肤到的距离，把穿刺针的长度固定好。

(二)胃液

1. 直接收集胃液法 急性实验时，先将动物，将插胃管经口插入胃内,在灌胃管的出口连一，用此可收集到胃液,此法适用于狗等大型动物。如是大鼠,需手术剖腹，从幽门端向胃内插入一塑料管，再由口腔经食道将一塑料管插入前胃，用pH7.5、35℃左右的生理盐水，以12ml/h的流速灌胃，收集流出液，进行分析。人类gan脏不含dan碱氧化酶，不存在dan碱缺乏问题，所以此模型不适于在发病机制上进行人类相关疾病的研究。

2. 制备胃瘘法 在慢性实验中,收集胃液多用胃瘘法,如全胃瘘法、巴氏小胃瘘法、海氏小胃瘘法等。制备小胃是将动物的胃分离出一小部分，缝合起来形成小胃，主胃与小胃互不相通，主胃进行正常消化，从小胃可收集到纯净的胃液。应用该法，可以待动物恢复健康后，在动物清醒状态下反复采集胃液。如运动能力及社会交往能力下降、探索行为能力下降、qin犯攻击能力缺陷、xing行为能力下降等。

(三)胰液和胆汁

在动物实验中，主要是通过对胰总管和胆总管的插管而获得胰液或胆汁。狗的胰总管开口于十二指肠降部，在紧靠肠壁处切开胰管，结扎固定并与导管相连，即可见无色的胰液流入导管。大鼠的胰管与胆管汇集于一个总管，在其入肠处插管固定，并在近肝门处结扎和另行插管，可分别收集到胰液和胆汁。狗等大动物常用的穿刺点：胸骨：穿刺部位是胸骨体与胸骨柄连接处。

有时也可通过制备胰瘘和胆囊瘘来获得胰液和胆汁。

营养不良性gan硬化动物模型

(1)fu制方法  离乳雄性大鼠，每日喂食缺乏dan碱的低蛋白高脂肪饲料8～10g，连续2～3个月。该饲料用酪蛋白或大豆作为蛋白来源，另加蔗糖、猪油、维生素粉、盐和定量的L-胱酸而组成。造模过程中，每日观察动物的一般活动状况，每周称量动物体重，造模结束后抽取全血制备xue清、称取部分肝组织制备匀浆作生化检测，摘取一些qi官称重，换算成脏器系数，并对肝组织进行组织形态学检查。如作的研究工作，就必须了解哪种动物是高癌种，哪种是低癌种，各种动物自发性的发生率是多少。

(2)模型特点  造模1个月时，约有20％动物si亡，2个月时，动物体重增长停止，有fu水潴留、出血、脱毛等现象出现，巨检可见典型的肝结节、脾肿大、腹shui潴留、yi腺肿大、gao丸萎缩等特有症状，有的还出现shen硬化，光镜检查显示，造模初期，肝组织呈小结节性脂肪gan硬化，随着饲育时闯的延长，出现粗大的结节性或小叶性gan硬化。(六)打孔或剪缺口法：可用打孔机在兔耳一定位置打一小孔来表示一定的号码。

(3)比较医学  膳食不平衡或特种营养素缺乏可以导致动物肝细胞病变。实验证明，长期喂食dan碱缺乏食物可诱发大鼠肝脂变、肝纤维化乃至gan硬化。本模型采用离乳大鼠是由于幼鼠在发育期阶段对dan碱的需求量较大，因dan碱缺乏造成对机体伤害的敏感性自然比成年动物更强。但事实上，对dan碱缺乏的敏感性取决于体内dan碱氧化酶的含量。人类gan脏不含dan碱氧化酶，不存在dan碱缺乏问题，所以此模型不适于在发病机制上进行人类相关疾病的研究。不过，该模型由于fu制周期长，饲料配制复杂，花费大，现已少见有单用此方法造模者。方法SD大鼠30只,采用随机数字表法随机分成5组每组6只:正常对照组(Control组),生理盐水组(NS组),尼古J3mg。此外，实验中使用雄性动物雄鼠是因为雄性动物在向gan硬化转化过程中比雌性动物更为均一。在饲料中混入微量的半胱氨酸具有促进gan硬化发展的作用。

缺钾动物模型饲料需要注意什么？

　　钾的作用：它参与细胞中糖和蛋白质的代谢，维持神经健康，并显示正常的心律。如果高钠引起gao血压，则钾具有jiang压作用。缺钾会导致心律不齐，心跳加快，心电图异常，虚弱和超敏反应，zui终可能导致心脏骤停。

　　1.实验组的饮食选择：

　　在准备定量饮食时，由于全谷物含有大量的钾，因此很难引起钾缺乏。使用精制饲料，您可以自由控制饲料中的钾含量，但您应注意以下方面：

　　低①低钾饲料：这种饲料中钾的轻度缺乏一般而言，饮食研究营养性钾缺乏症或由于慢性脏疾病引起的钾缺乏症，并且与慢性缺乏症有关，且喂养时间相对较长。由于它是钾的症状，因此请确保饲料中钾的含量不要太低。

　　②钾缺乏饲料：饲料中钾的含量很低，没有钾的临界值。通常针对急性缺钾研究这种饲料，但是由于钾的极度缺乏，动物血液中的钾急剧下降，引起巨大的湍流，容易si亡。 ，有必要缩短进给时间以缩短观察时间。

　　2.对照组饲料选择：

　　精饲料缺乏钾，对照组也应使用精饲料来制备正常的钾含量饲料。请注意以下几点：

　　①饮食中的钾含量过高，经常对照饮食中的钾含量不符合标准。此控制实际上是高钾饮食，低于阈值。

　　②设定钾含量时，在准备饲料之前必须注意实验动物的类型，因为饲料中对钾含量的要求因动物而异，敏感性也不同。

　　也就是说，在选择模型进给时，无论是实验组还是对照组，都应从多个角度设置微量元素设定值的参数范围，以避免过度短缺和超负荷的问题。需要考虑的。

大鼠烫l伤动物模型

方法  按30mg/kg体重的剂量经腹腔注射3％戊巴l比妥钠麻l醉大鼠，根据体重腹部备皮，然后固定于实验台上。将大鼠移近加热自来水的烧杯，将纱布条浸入热水中，待水温恒定于99℃时，取出纱布，立即平铺于待烫部位，以纱布接触大鼠皮肤后计时。

(2)模型特点  大体观察：致伤3s大鼠局部皮肤发红、轻微水肿。愈合后毛发生长良好，有少量红褐色色素沉着，皮肤轻微挛缩，表皮光滑。致伤10s大鼠局部皮肤发白、水肿。愈合后毛发生长良好，皮肤瘢痕形成，表面粗糙不平。光镜观察：致伤3s大鼠表皮层次尚清楚，细胞明显肿胀、变性，层次结构尚清楚，细胞核结构不清。表皮内有水疱形成，真皮水肿、间质疏松，胶原纤维断裂，嗜酸性染色性能减退，呈嗜双色性。血管扩张、充血，皮脂腺、汗腺腺上皮细胞及毛囊上皮细胞尚清楚，部分肿胀、溶解。皮下组织中血管扩张、充血。致伤10s大鼠表皮细胞部分脱落，结构不清，明显变性、坏死，部分细胞已溶解。实验动物的分组(一)分组的原则：进行动物实验时，经常需要将选择好的实验动物按研究的需要分成若干组。表皮内有水疱形成，真皮层间质疏松、充血，胶原纤维融合成片，嗜酸性染色性能减退，呈嗜双色性，大部分皮脂腺、汗腺、毛囊被破坏，结构不清，真皮深部可见残余毛囊。皮下组织血管扩张、充血l、水肿明显，结构未破坏。上述结果表明，致伤3s大鼠为浅Ⅱ度烫l伤，致伤10s大鼠为深Ⅱ度烫l伤.