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发布时间:2022-01-18 04:42:00 作者:英瀚斯
实验动物的选择在此,提几点原则和方法。
第①,做什么样的实验?什么动物适合本实验?做什么实验,这是选题时就确定好了的。肯定是经过论证的。无需多讲。用什么样的动物呢?我想,大多是参照文献,再结合自己对实验动物的了解。选题之时就肯定阅读过很多文献了,因此不会陌生。
如:做高、动脉粥样硬化,我想大多数人会选择大鼠、兔子,也可以选金黄地鼠、鹌鹑,少数人会选小鼠,但我想用狗和猴的基本上不会有吧。因为要选择比较容易形成此疾病的动物,且要易得。
所以,对于不太熟悉的人来说,要多看文献,参考别人是如何选择的。就算是对动物比较了解,系统学过这方面知识的,也要多看文献,综合权衡。切忌随意地凭空想像。
第二,采取什么样的方法造模?做动物实验通常是要造模的。选择什么样的方式?这要从实验的目的及条件入手。造,可以用手术,也可以用。其中有四氧及链脲佐菌素(STZ)。后者用得较多,且为国际认同。
而四氧目前用得较少了。造模方法一是参照《药理实验方法学》,二是参照文献。造模方法有时也决定了你的动物选择。像做手术造动脉粥样硬化,我想用大鼠比小鼠来得方便吧?
第三,经费承受能力如何?适用于狗等大动物的脱毛剂配方为:10g,生石灰15g,溶于100ml水中。做实验也要精打细算。不可能为了所谓的高水平、技术而不顾实验室的条件。像做高脂动物模型,假设经费只有一万多元,一定要弄个敲除APoE基因的小鼠来做,恐怕没人认同。做一个简单的镇痛实验,你非得要用SPF实验室,这也是不太实际的,也是没必要的。
shen大部切除所致的慢性衰模型
5/6shen切除手术一期法:成年雄性Wistar 大鼠,先切除右shen,随后结扎左shen上、下极并切除之,不要损伤两侧shen上腺。切除之shen组织称重,以右shen重量减去所切除的左shenshen组织重量来间接估算残余shen重量,并算出切除率。大鼠5/6shen切除后shen脏特征性改变有:shen脏早期代偿性肥大的,shen小球高灌注、高滤过、高压力,继之出现shen小球硬化、毛xi血管囊萎陷、系膜进行性扩张、小管间质性损害,后者表现为小管细胞萎缩、小管扩张、间质yan症细胞浸润、纤维化,zui终发展为进行性shen功衰。动物分组应按随机分配的原则,使每只动物都有同等机会被分配到各个实验组与对照组中去,以避免各组之间的差别,影响实验结果,特别是进行准确的统计检验,必须在随机分组的基础上进行。
shen综合征出l血热(HFRS)的动物模型怎么制备?
(1)繁殖方法:收集大约4周龄的沙鼠,并在感l染前1天,感l染后1天,2天和4天腹膜内施用30mg/kg体重。内部注射环磷酰胺的总剂量为120 mg/kg体重,该病毒在第0天被感l染。感l染的方法是固定沙鼠,在轻度麻l醉后用HFRS病毒细胞培养上清液接种大脑,并接种0.3 ml /头。xue清LH和FSH水平在10~12d时降至zui低,以后逐渐上升至56d时恢复正常。
(2)模型的特征接种和感l染后,模型沙鼠通常在第8到12天患病,没有活动,嗜睡,闭眼,毛囊,卷曲,昏迷,后肢麻l痹,发病后一次?操作时要小心仔细、大胆敏捷、熟练准确、不能粗暴,不能恐吓动物,同时,要爱惜动物,使动物少受痛苦。2d死l亡。冷冻切片和间接免l疫荧光技术可以检测脑,肺,脾,肝,肠,shen以及其他患病和死l亡的沙土鼠组织中的HFRS病毒抗原,无论采用何种感l染方法,导致全身感l染,尤其是脑和肺。当病毒被稀释到10 -8的功效时,它不会引起急性的感l染。
(3)比较医学shen综合征出l血热(HFRS)具有复杂的临床表现和特殊的病史。先前的研究表明,HFRS的病因与人体的免l疫病理学有关,具有明显的免l疫功能障碍。蒙古沙鼠是易受HFRS病毒感l染的实验动物,蒙古沙鼠HFRS感l染模型可用于大规模生产HFRS灭活疫l苗,HFRS临床病因和药l物治l疗。造模后4d,以TUNEL法检测大鼠视网mo和视神经细胞凋亡,造模后7d,RT-PCR、Western-blot检测视wang膜和视神经节细胞组织Caspase-3、BCL-2基因和蛋白表达。
Y迷宫实验几种常见的行为学测试方法
1、Y迷宫(Y-Maze)交替行为测试原理
Y-迷宫由Dellu F等发明,被广泛应用于功能减退、趋向性、空间工作记忆等研究领域。Y迷宫主要用于研究啮齿类动空间工作记忆,其完全是利用实验动物对新异环境探索的天性,由于动物每次转换探索方向时都需要记住前一次探索过的方向,因此Y型迷宫实验能够有效地测定动物的空间工作能力。能改善jia亢模型大鼠甲状腺组织病理变化,其中高剂量组甲状腺组织结构基本同正常组。
1.1 Y迷宫交替行为测试及参数
自制Y迷宫,由3等长臂组成(50cm×18cm×35cm),每两个臂之间夹角为
120度,在中央处各有一个可移动的隔板,迷宫内臂及底部均涂为黑色。参照文献实验操作方法并加以改进,将大鼠放在Y迷宫任意一臂末端,任其自由探索8min,摄像系统记录动物8min的行为变化,记录以下各项指标:①总进臂次数(the total number of entries):动物进入迷宫臂的次数(以大鼠四只脚均进入臂为进臂一次标准);方法是用剪毛刀在动物一侧或背部剪出号码,此法编号清楚可靠,但只适于短期观察。②轮流(交替)一次(an alternation):依次连续进入Y迷宫全部三个臂一次。③*大轮流次数(The number of maximum alternati):总进臂次数-2。自发轮流行为得分=总轮流次数/*大轮流次数*100%。
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