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发布时间:2021-11-30 03:17:00 作者:英瀚斯
阑尾炎动物模型
方法 成年大鼠,后固定,无菌条件下开腹,将阑尾及末端回肠和与阑尾系膜相连的肠段(下称临近肠段)移出腹腔并置壁上。剪开阑尾尖部的阑尾系膜,把阑尾尖部肠内容物挤至阑尾近端肠腔内,距尖部1cm处用1号丝线将阑尾管攀结扎。给实验组动物某种处理,而给正对照组用同样方法进行处理,但并不采用实验所要求的或手段,负对照组则不给任何处理。把结扎了的阑尾尖部摆放在回肠根部和临近肠段之间。用小圆针细丝线(000号)把回肠根部和临近肠段相应位置缝合一针(仅穿透浆肌层),后将结扎阑尾包埋于其下。再顺续沿末端回肠由远端至近端与临近肠段相应位置紧密缝合1~2针,将阑尾全部包埋在缝合的肠段之下。将外置的全部肠段送入腹腔,两层缝合关腹,无菌纱布包扎伤口,送回笼中饲养观察。或成年家兔,后固定于手术台架上,备皮消毒铺巾后,无菌条件下腹正中切口开腹6cm,寻及盲肠提出阑尾,于阑尾根部以4号丝线紧贴阑尾壁穿过系膜结扎阑尾,随后将阑尾纳回腹腔,逐层关腹。术后,在规定的时间点测定动物体温,行坏死阑尾炎腔内容物细菌培养,包囊或坏死阑尾大小的检测,以及肉眼病理观察和组织形态学改变的镜检。
特点 大鼠术后15d,阑尾呈脓性坏死,外裹一层纤维性包囊,囊内含有大量的细菌,模型成功率高。兔术后6~12h,阑尾充血、增粗、水肿;12~24h时,阑尾肿胀、增粗更为明显,外被脓苔与周围肠管粘连,部分阑尾壁可见斑点状出血灶,腹腔内有脓性渗液出现。5、断头采血:操作者左手拇指和食指握住鼠颈部,头朝下,用利剪在头颈间1/2处迅速剪动物头部,提起动物,血液即可流入准备好的容器中。与阑尾脓苔粘连的周围肠管亦呈明显的水肿、充血,甚或有阑尾系膜形成。腹腔渗液细菌培养有大肠生长。术后24h,兔体温可升至40℃左右。在整个造模过程中,模型动物神态萎靡,不食不饮,腹部胀满,2~4d内陆续。
方法SD大鼠30只,采用随机数字表法随机分成5组每组6只:正常对照组(Control组),生理盐水组(NS组),尼古J3 mg. kg-1.d-1组(NT3组),尼古丁9mg-kg-1.d-1组(NT9组)和尼古丁18 mg.' kg-1. d1组(NT18组),.分别不zhu射,皮下zhu射生理盐水,尼古丁1 mg/kg,3 mg/kg和6
mg/kg,3次/d,连续7d.末次注射后60 min皮xia注射美加明1 mg/kg.观察大鼠注射尼古J期间和戒断后体重变化,存活情况和古丁戒断评分另外选取Control组NS组和NT9组各6只大鼠测定右下肢足底MWT和TWL.结果与NT3组比较,注射尼古丁后第7天.NT9组和NT18组大鼠体重增加缓慢[(3.8+1.3),(2.0+0.3)g vs (7.2+1.0)g](P <0.05),戒断后di1天和第2天大鼠体重增加迅速(P <0.01).NT9组和NT18组大鼠美加明激发后出现更多的戒断症状(P<0.01,.NT18组大鼠si亡率为17%.与Control组比较.NT9组大鼠在尼古J戒断后MWT与TWL明显降低(P <0.01).结论间断皮xia注射尼古J9 mg-kg-1.d-17 d可以成功制作改良尼古J依赖戒断大鼠模型,尼古J戒断后大鼠疼痛敏感性加高.
前lie腺素E2对大鼠巨噬细胞株NR8383 合成血管内皮生长因子促进人脐静脉血管内皮细胞成管、迁移的影响
方法:分别采用0.1 nmol/L PGE2、1 nmol/L PGE2、1 nmol/L PGE2+10 nmol/L EP2受体抑zhi剂AH6809+10 nmol/L EP4受体抑zhi剂AH23848 处理的NR8383 细胞作为各实验组,选择未经PGE2以及其特异性受体抑zhi剂处理的NR8383 细胞作为对照组,采用Western blot 和qPCR方法检测各组NR8383细胞内V***蛋白以及mRNA的表达水平;收集以上各处理组的细胞培养上清液分别刺激1HUVECs,运用TRANSWELL 小室、Matrigel 胶细胞成管实验等实验方法,观察PGE2调控巨噬细胞对HUVEC 迁移效应和成管能力的影响。至56dluan巢呈现多囊样改变,6个月后该病理改变呈渐进性发展趋势。
结果:随着NR8383 细胞培养液中加入PGE2浓度增gao,其 V***蛋白表达和V*** mRNA的表达水平显著升高(P<0.05);0.1 nmol/L、1 nmol/L PGE2处理过的NR8383细胞培养上清液可以显著增加HUVEC细胞形成的小管面积,形成小管面积随着PGE2处理浓度的增加而增加(P<0.05);HUVECs的迁移运动也随着PGE2处理浓度的升高不同程度的增强,HUVECs趋化的数量显著升高(P<0.05);研究发现PGE2特异性的EP2/EP4 受体拮抗剂AH6809/AH23848,可以显著抑制PGE2 增强NR8383 细胞内V*** mRNAs 表达的作用并且也显著抑制PGE2 增强 NR8383细胞促进HUVECs成管和趋化能力的效应(P<0.05)。利用这类动物疾病模型来研究人类疾病的优点,就是疾病的发生并发展与人类相应的疾病很相似,均是在自然条件下发生的疾病,其应用价值就很高,但是这类模型来源较困难,不可能大量应用。
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