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发布时间:2021-11-14 09:48:00 作者:英瀚斯
1 被动吸烟模型
(1)方法 实验豚鼠(雌雄不限),将豚鼠置放在封闭的通气隔离包中,每天暴露在xiang烟烟雾环境中(10支/次,1次/d,5d/周,连续1, 3, 6, 12个月作肺组织病理学及肺功能检查),即可建立模拟人类吸烟引起的动物模型。
(2)模型特点 本模型病理表现 为进行性肺泡腔扩大、肺功能减退,造模12个月后即使停止给予动物烟雾暴露环境,模型动物肺泡腔的病理学改变仍可呈进行性发展,不能恢复正常。模型动物出现的百分比、病变轻重程度与吸烟时间密切相关;大鼠、小鼠的采集:用颈椎脱臼法处死动物,剥离出胸骨或股骨,用吸取少量的Hank平衡盐溶液,冲洗出胸骨或股骨中全部液。因模型时间较长,实验过程中影响因素较多,模型的稳定性相对较差。
2 蛋白酶模型
(1)方法 成年大鼠(雌雄不限),经yi醚后仰卧固定头部及四肢,轻拉鼠舌,压迫舌腹,在额镜直视下,趁大鼠呼吸瞬间,迅速将已装有木瓜蛋白酶溶液连有的细塑料插管插入达气管分叉处,随后慢慢推入木瓜蛋白酶(2mg/kg体重)溶液,注入溶液体积控制在0.2ml/100g体重或以下。滴完溶液后,可辅助大鼠作各种直立、旋转等动作,以便所滴溶液在大鼠肺内均匀分布,然后大鼠自由饮水进食。(四)化学药品涂染动物被毛法:经常应用的涂染化学药品有涂染红色:0。
(2)模型特点 大鼠在造模4d后开始出现一系列的渐进理变化,肺功能检查模型大鼠第4日时的胸腔气体容积(TGV)值增加65%,而到第8日就不再变化,而造模前后大鼠气道阻力(Raw)值则变化无显著性差异。病理组织学检查模型大鼠在发生早期(1周以内)主要是肺泡上皮细胞发生了破坏,而在晚期阶段则可见Ⅱ型肺泡上皮细胞增多,以及肺泡间隔内局限性胶原纤维及弹性纤维的聚集。但本模型(犬)在测定肺功能时表明,动物呼气流速的下降与静态顺应性的下降不成比例,同时病理组织学也证实动物气道萎缩,气道病变说明本模型不是单纯性的较佳模型。此方法为饮食诱导+化学试剂诱导,一般是用STZ加高脂高糖的膳食诱导来构建tang尿病模型模型。
4种肺动脉高压(PH)动物模型肺血管重构模式的差异
方法:雄性SD大鼠(350-400g),分别通过腹主动脉-腔静脉分流(A-VF,n=10)、左肺切除(PE,n=10)、野百合碱注射(MCT,n=10)、左肺切除+MCT(PE+MCT,n=12)4种方法建立PH模型.检测平均肺动脉压力(m***)、RV/(LV+S)重量比值、肺小动脉中膜厚度百分比(WT%)、无肌性动脉肌化程度和新生内膜(neointima)形成、新生内膜增殖度和血管阻塞计分(VOS).
结果:在PE+MCT组(肺切除术后5周,MCT注射后4周)右肺腺泡内血管出现了新生内膜病变,其它组均没有新生内膜病变形成.PE+MCT组的动物出现了严重的右心室肥大,动脉中膜明显增厚,平均肺动脉压(m***)和无肌性血管肌化程度显著增加;A-VF、PE和MCT组仅形成轻-中度的右心室肥大、m***升高和小动脉肌化.结论:左肺切除联合应用MCT能成功诱导大鼠PH新生内膜模型,该模型能更好地模拟人类严重PH的病理改变,是研究梗阻性PH更为适用的动物模型.
大动脉转位致紫绀型心脏病动物模型
【造模方法】 体重为1.5~2.0kg雄性新西兰兔,按30mg/kg体重的剂量经耳缘静脉注射硫喷妥钠麻l醉,然后每隔30min静脉注射3~5mg/kg体重的剂量维持麻l醉。动物行仰卧位固定,前胸部皮肤常规去毛后消毒,作前正中无菌手术切口,切开皮肤、皮下组织及肌层,于第6、第7肋间水平横断胸骨,延正中线向上剪开胸骨,撑开器撑开,剪开心包,暴露心脏,注意保持纵隔胸膜的完整。游离肺动脉后,用4号丝线双活结结扎左心耳根部以阻断血流,于左心耳内注入1%肝素,用侧壁钳钳夹肺动脉左侧壁,在与左心耳对应部位剪开4~5mm的切口,用8/0的无损伤尼龙缝合线将肺动脉与左心耳侧侧吻合,先连续外翻缝合后壁,再间断外翻缝合前壁。缝线打结前排尽空气,先松开左心耳根部的结扎线,再缓慢松开肺动脉上的侧壁钳。生理盐水冲洗胸腔,置入硅胶引流片,关胸。术后每日肌肉注射青l霉l素40万U以预防感l染,共5d,术后3d拔取引流条。手术当中观察左心耳的颜色变化。于术后第4周,麻l醉,经腹l股l沟处切口l,l暴露股动脉,抽血测定pH值、氧分压(PO2)、二氧化碳分压(PCO2)、氧饱和度(SaO2)、血红蛋白含量(Hb)、红细胞比容(Hct)。采血后处死动物,观察心脏及吻合情况。术中吻合完成时可见左心耳颜色明显变暗,术后4周处死动物可见双心室轻度扩大,以右心室明显,吻合口通畅,直径为3~4mm,吻合口处光滑。5、断头采血:操作者左手拇指和食指握住鼠颈部,头朝下,用利剪在头颈间1/2处迅速剪动物头部,提起动物,血液即可流入准备好的容器中。术后1周动物的PO2、SaO2明显降低。术后第4周,PO2和SaO2的降低程度有所减小,考虑是代偿的原因。注意吻合口的大小要严格控制在4~5mm,太大时,严重的低氧会造成动物早期死l亡;太小时,有不能满足实验的要求,且容易形成血l栓而堵塞吻合口。
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