杭州动物行为学常用指南 英瀚斯生物科技公司

实验动物的给法

(一)注射给药法

1. 皮射 注射时用左手拇指及食指轻轻捏起皮肤，右手持将针头刺入,固定后即可进行注射。一般小鼠在背部或前肢腋下，大鼠在背部或侧下腹部；豚鼠在后大腿内侧、背部等脂肪少的部位；兔在背部或耳根部注射；方法SD大鼠30只,采用随机数字表法随机分成5组每组6只:正常对照组(Control组),生理盐水组(NS组),尼古J3mg。蛙可在脊背部淋巴囊注射；狗多在大腿外侧注射，拔针时，轻按片刻，防药液逸出。

2. 皮内注射 此法用于观察皮肤血管的通透性变化或观察皮内反应。 如将一定量的性同位素溶液、颜料或致炎物质、等注入皮内，观察其消失速度和局部血液循环变化，作为皮肤血管通透性观察指标之一。方法是：将动物注射部位的毛剪去，消毒后，用皮试针头紧贴皮肤皮层刺入皮内，然后使针头向上挑起并再稍刺入，即可注射药液。注射后可见皮肤表面鼓起一白色小皮丘。髓磷脂特异性T细胞在外周被ji活，穿过血脑屏障进入zhong枢神经系统并被重新ji活，引发一系列yan症反应，导致脱髓鞘和轴突细胞凋亡，zui终导致神经损伤和失去功能。

3. 肌肉注射 当给动物注射不溶于水而混悬于油或其他溶剂中的时,常采用肌肉注射。肌肉注射一般选用肌肉发达、无大血管经过的部位，多选臀部。

注射时针头要垂直快速刺入肌肉，如无回血现象即可注射。给大、小鼠作肌肉注射时，选大腿外侧肌肉进行注射。

4. 腹腔注射 先将动物固定,腹部用酒精棉球擦试消毒，然后在左或右侧腹部将针头刺入皮下，沿皮下向前推进约0.5厘米，再使针头与皮肤呈45 度角方向穿过腹肌刺入腹腔，此时有落空感，回抽无肠液、尿液后，缓缓推入药液。此法大小鼠用的较多。

5. 静脉注射 是将药液直接注射于静脉管内，使其随着血液分布全身,迅速奏效。但排泄较快，作用时间较短。

小鼠、大鼠的静脉注射：常采用尾静脉注射。鼠尾静脉共有3根， 左右两侧和背侧各1根，两侧尾静脉比较容易固定，故常被采用。操作时，先将动物固定在暴露尾部的固定器内(可用烧杯、铁丝罩或粗试管等物代替),用75％酒精棉球反复擦试使血管扩张, 并可使表皮角质软化，以左手拇指和食指捏住鼠尾两侧，使静脉充盈,注射时针头尽量采取与尾部平行的角度进针。他指出：“正在进行实验的实验小鼠会遭以想象的困扰，公众将不会支持这项研究，不会割断和瘫痪动物的脊椎，并会对人类造成长期的脊髓损伤。

根据GB19489-2004实验室 生物 安全通用要求,动物实验室的 生物 安全要点:

动物实验室的生物安全防护设施应参照BSL1-4实验室的要求，还应考虑对动物呼吸、排泄、毛发、抓咬、挣扎、逃逸、动物实验（如染毒、医学检查、取样、解剖、检验等）、动物饲养、动物及排泄物的处置等过程产生的潜在生物危害的防护。应特别注意对动物源性气溶胶的防护，例如对动物的剖检应在负压剖检台上进行。科学家利用电子芯片技术遥控瘫痪实验鼠行走据国外媒体报道，科学家创造了一种“遥控”实验小鼠。

应根据动物的种类、身体大小、生活习性、实验目的等选择具适当防护水平的、于动物的、符合国家相关标准的 生物安全柜 、动物饲养设施、动物实验设施、消毒设施和清洗设施等。

实验室建筑应确保实验动物不能逃逸，非实验室动物（如野鼠、昆虫等）不能进入。实验室设计（如空间、进出通道等）应符合所用动物的需要。

动物实验室空气不应循环。动物源气溶胶应经适当的过滤/消毒后排出，不能进入室内循环。

如动物需要饮用无菌水，供水系统应可安全消毒。

动物实验室内的温度、湿度、照度、噪声、洁净度等饲养环境应符合国家相关标准的要求。

1 被动吸烟模型

(1)方法  实验豚鼠(雌雄不限)，将豚鼠置放在封闭的通气隔离包中，每天暴露在xiang烟烟雾环境中(10支/次，1次/d，5d/周，连续1, 3, 6, 12个月作肺组织病理学及肺功能检查)，即可建立模拟人类吸烟引起的动物模型。

(2)模型特点  本模型病理表现 为进行性肺泡腔扩大、肺功能减退，造模12个月后即使停止给予动物烟雾暴露环境，模型动物肺泡腔的病理学改变仍可呈进行性发展，不能恢复正常。模型动物出现的百分比、病变轻重程度与吸烟时间密切相关；动物模型设计的注意事项注意模型要尽可能再现所要求的人类疾病模型时必须强调从研究目的出发，熟悉诱发条件、宿主特征、疾病表现和发病机理，即充分了解所需动物模型的全部信息，分析是否能得到预期的结果。因模型时间较长，实验过程中影响因素较多，模型的稳定性相对较差。

2 蛋白酶模型

(1)方法  成年大鼠(雌雄不限)，经yi醚后仰卧固定头部及四肢，轻拉鼠舌，压迫舌腹，在额镜直视下，趁大鼠呼吸瞬间，迅速将已装有木瓜蛋白酶溶液连有的细塑料插管插入达气管分叉处，随后慢慢推入木瓜蛋白酶(2mg/kg体重)溶液，注入溶液体积控制在0.2ml/100g体重或以下。滴完溶液后，可辅助大鼠作各种直立、旋转等动作，以便所滴溶液在大鼠肺内均匀分布，然后大鼠自由饮水进食。8周组大鼠出现明显气道壁增厚、气道狭窄及显著肺qi肿改变,气道壁炎细胞浸润、杯状细胞化生、气道壁坏死糜lan、纤维结缔组织及平滑肌增sheng等评分均显著高于对照组(P<。

(2)模型特点  大鼠在造模4d后开始出现一系列的渐进理变化，肺功能检查模型大鼠第4日时的胸腔气体容积(TGV)值增加65％，而到第8日就不再变化，而造模前后大鼠气道阻力(Raw)值则变化无显著性差异。病理组织学检查模型大鼠在发生早期(1周以内)主要是肺泡上皮细胞发生了破坏，而在晚期阶段则可见Ⅱ型肺泡上皮细胞增多，以及肺泡间隔内局限性胶原纤维及弹性纤维的聚集。但本模型(犬)在测定肺功能时表明，动物呼气流速的下降与静态顺应性的下降不成比例，同时病理组织学也证实动物气道萎缩，气道病变说明本模型不是单纯性的较佳模型。打号前用蘸有酒精的棉球擦净耳朵，用耳号钳刺上号码，然后在烙印部位用棉球蘸上溶在食醋里的黑墨水擦抹。

zi宫腺肌病小鼠的yao物疗xiao及其疼痛机制

　目的：了解腺肌病小鼠的药wuzhi疗liao效及疼痛机制。

　方法：他莫昔芬法建模。以不同yao物zhi疗后，监测小鼠动情周期，检测5-HT、GnRH-R、NGF、NF的水平。

　结果：对照组5-HT水平明显高于造模组。GnRH-R及NGF在正常内膜、在位内膜的表达显著低于异位内膜。NF在正常内膜的表达显著低于在位内膜、异位内膜。

　结论：与全量抑那通相似，半量抑那通可减缓腺肌病进展，但对动情周期影响无明显优势。全量抑那通后使用达英-35可巩固疗xiao。5-HT可能在腺肌病疼痛机制中发挥作用。