临床前动物实验质粒构建,南京英瀚斯生物科技

实验动物的抓取和固定

在进行实验时，为了不损伤动物的健康，不影响观察指标，并防止被动物咬伤，首先要限制动物的活动，使动物处于安静状态，工作人员必须掌握合理的抓取固定方法。抓取动物前，必须对各种动物的一般习性有所了解。操作时要小心仔细、大胆敏捷、熟练准确、不能粗暴，不能恐吓动物，同时，要爱惜动物，使动物少受痛苦。(2)模型特点本模型病理表现为进行性肺泡腔扩大、肺功能减退，造模12个月后即使停止给予动物烟雾暴露环境，模型动物肺泡腔的病理学改变仍可呈进行性发展，不能恢复正常。

膀胱结shi动物模型

(1)方法  体重55～60g的幼龄大鼠，单笼饲养。标准大鼠饲料中加入5％的苯二甲酸(terephthalic acid,  TPA)，用此实验饲料喂养大鼠，连续14d，大鼠自由饮水。造模第十四日时，动物用戊ba比妥钠ma醉后手术取出膀胱，将其置放于10％甲醛溶液固定，作常规组织切片，HE染色及 Von Kossa氏钙显示法染色，光镜下观察。如运动能力及社会交往能力下降、探索行为能力下降、qin犯攻击能力缺陷、xing行为能力下降等。

(2)特点  用含5％TPA饲料喂养14d后，模型大鼠膀胱腔内均含有大小不等、数量不一的钙化小体，钙化小体周围被一层厚薄不一均质状的物质所包裹，小体内的黑色钙盐呈分布不均的颗粒状，有的可聚集成团块状。本模型制作方法简便，造模时间短，模型成功率，重复性好。若用二棉球涂擦尾部或事先将鼠尾浸在45℃水中数分钟，使尾部血管充盈，可采到较多的血，但注意二可致溶血。

膀胱原位癌模型方法

分组及处理雌性C57BL/6小鼠150只,随机.分成A(膀胱粘膜未预处理组).B(膀胱粘膜预处理表浅模型观察组),C(膀胱粘膜预处理丝lie霉su治liao组)、D(膀胱粘膜预处理PBSzhi疗对照组)和E(膀胱粘膜预处理不zhi疗生存期观察组)5组，每组30只。在灌注MB49膀胱ai细胞前，其中A组不进行预处理,B、C、D和E组则对膀胱粘膜进行预处理。在灌注MB49膀胱ai细胞后,A组不作任何处理;B组在灌注后第7天始每隔3d处死3只解剖观察膀胱肿liu生长情况及有无转移,并取qi官组织(膀胱、shen、输尿管.心、肝、肺、脾)做病理切片(HE和免yi组化染色);C组在灌注后di1天开始给予si裂mei素(0.05 mg/ml)0.1 m'膀胱灌注zhi疗,每隔3d1次,连续6次;D组灌注后di1天开始给予PBS膀胱灌注,每隔3dl次,连续6次;E组不作处理。所有小鼠观察- - 般情况(精神状态、饮食、体质量等)zhong瘤生长情况(是否成瘤.肿liu大小.有无血尿、远处转移等)和生存期,并对si亡小鼠进行解剖,留取膀胱.shen、输尿管、心、肝、肺、脾等组织用4%福er马林固定(C.D组小鼠膀胱固定前称重)。也可用锋利刀片割破尾动脉或尾静脉，让血液自行流出，采血后，消毒，止血。灌注后第60天,处死A.C.D和E组未si亡小鼠,解剖并留取膀胱.shen、输尿管、心、肝、肺、脾等组织用4%福er马林固定,C、D.E组小鼠膀胱固定前称质量，

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zi宫腺肌病小鼠的yao物疗xiao及其疼痛机制

　目的：了解腺肌病小鼠的药wuzhi疗liao效及疼痛机制。

　方法：他莫昔芬法建模。以不同yao物zhi疗后，监测小鼠动情周期，检测5-HT、GnRH-R、NGF、NF的水平。

　结果：对照组5-HT水平明显高于造模组。GnRH-R及NGF在正常内膜、在位内膜的表达显著低于异位内膜。NF在正常内膜的表达显著低于在位内膜、异位内膜。

　结论：与全量抑那通相似，半量抑那通可减缓腺肌病进展，但对动情周期影响无明显优势。全量抑那通后使用达英-35可巩固疗xiao。5-HT可能在腺肌病疼痛机制中发挥作用。