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发布时间:2020-12-04 21:23:00 作者:英瀚斯
实验动物的给法
(一)注射给药法
1. 皮射 注射时用左手拇指及食指轻轻捏起皮肤,右手持将针头刺入,固定后即可进行注射。一般小鼠在背部或前肢腋下,大鼠在背部或侧下腹部;豚鼠在后大腿内侧、背部等脂肪少的部位;兔在背部或耳根部注射;蛙可在脊背部淋巴囊注射;狗多在大腿外侧注射,拔针时,轻按片刻,防药液逸出。
2. 皮内注射 此法用于观察皮肤血管的通透性变化或观察皮内反应。 如将一定量的性同位素溶液、颜料或致炎物质、等注入皮内,观察其消失速度和局部血液循环变化,作为皮肤血管通透性观察指标之一。方法是:将动物注射部位的毛剪去,消毒后,用皮试针头紧贴皮肤皮层刺入皮内,然后使针头向上挑起并再稍刺入,即可注射药液。注射后可见皮肤表面鼓起一白色小皮丘。
3. 肌肉注射 当给动物注射不溶于水而混悬于油或其他溶剂中的时,常采用肌肉注射。肌肉注射一般选用肌肉发达、无大血管经过的部位,多选臀部。
注射时针头要垂直快速刺入肌肉,如无回血现象即可注射。给大、小鼠作肌肉注射时,选大腿外侧肌肉进行注射。
4. 腹腔注射 先将动物固定,腹部用酒精棉球擦试消毒,然后在左或右侧腹部将针头刺入皮下,沿皮下向前推进约0.5厘米,再使针头与皮肤呈45 度角方向穿过腹肌刺入腹腔,此时有落空感,回抽无肠液、尿液后,缓缓推入药液。此法大小鼠用的较多。
5. 静脉注射 是将药液直接注射于静脉管内,使其随着血液分布全身,迅速奏效。但排泄较快,作用时间较短。
小鼠、大鼠的静脉注射:常采用尾静脉注射。鼠尾静脉共有3根, 左右两侧和背侧各1根,两侧尾静脉比较容易固定,故常被采用。操作时,先将动物固定在暴露尾部的固定器内(可用烧杯、铁丝罩或粗试管等物代替),用75%酒精棉球反复擦试使血管扩张, 并可使表皮角质软化,以左手拇指和食指捏住鼠尾两侧,使静脉充盈,注射时针头尽量采取与尾部平行的角度进针。
实验动物的标记
1. 染色法 适用于小动物,如兔子、大鼠、小鼠等。此方法是将化学药品涂在动物的被毛上,以不同颜色来区分动物。常用的化学药品有:3%~5%溶液(黄色)、0.5%中性品红(红色)、2%(咖啡色)。
标记的原则是:先左后右,从上到下。如果动物编号是二位数或三位数,那相应的用二种或三种不同的颜色,不同颜色代表不同位数(个位、十位、百位),标记的原则同上。
2. 挂牌法 常用于大动物。写有编号的金属牌挂在动物的颈上来区分动物。对于猴、狗、猫等动物有时可不做标记,只记录它们的外表特征和毛色即可。
3. 笼子编号 标记在笼子上。
以上只介绍了几种的方法,在使用中可灵活掌握。
实验动物的选择在此,提几点原则和方法。
第①,做什么样的实验?什么动物适合本实验?做什么实验,这是选题时就确定好了的。肯定是经过论证的。无需多讲。用什么样的动物呢?我想,大多是参照文献,再结合自己对实验动物的了解。选题之时就肯定阅读过很多文献了,因此不会陌生。
如:做高、动脉粥样硬化,我想大多数人会选择大鼠、兔子,也可以选金黄地鼠、鹌鹑,少数人会选小鼠,但我想用狗和猴的基本上不会有吧。因为要选择比较容易形成此疾病的动物,且要易得。
所以,对于不太熟悉的人来说,要多看文献,参考别人是如何选择的。就算是对动物比较了解,系统学过这方面知识的,也要多看文献,综合权衡。切忌随意地凭空想像。
第二,采取什么样的方法造模?做动物实验通常是要造模的。选择什么样的方式?这要从实验的目的及条件入手。造,可以用手术,也可以用。其中有四氧及链脲佐菌素(STZ)。后者用得较多,且为国际认同。
而四氧目前用得较少了。造模方法一是参照《药理实验方法学》,二是参照文献。造模方法有时也决定了你的动物选择。像做手术造动脉粥样硬化,我想用大鼠比小鼠来得方便吧?
第三,经费承受能力如何?做实验也要精打细算。不可能为了所谓的高水平、技术而不顾实验室的条件。像做高脂动物模型,假设经费只有一万多元,一定要弄个敲除APoE基因的小鼠来做,恐怕没人认同。做一个简单的镇痛实验,你非得要用SPF实验室,这也是不太实际的,也是没必要的。
膀胱结shi动物模型
(1)方法 体重55~60g的幼龄大鼠,单笼饲养。标准大鼠饲料中加入5%的苯二甲酸(terephthalic acid, TPA),用此实验饲料喂养大鼠,连续14d,大鼠自由饮水。造模第十四日时,动物用戊ba比妥钠ma醉后手术取出膀胱,将其置放于10%甲醛溶液固定,作常规组织切片,HE染色及 Von Kossa氏钙显示法染色,光镜下观察。
(2)特点 用含5%TPA饲料喂养14d后,模型大鼠膀胱腔内均含有大小不等、数量不一的钙化小体,钙化小体周围被一层厚薄不一均质状的物质所包裹,小体内的黑色钙盐呈分布不均的颗粒状,有的可聚集成团块状。本模型制作方法简便,造模时间短,模型成功率,重复性好。
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