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睡眠剥夺模型

实验用金属箱直径35 cm， 每箱装1只大鼠。REMSD 各组分别置于直径为6.5 cm的小站台上，对照组大鼠置于直径15 cm的大站台上，周围是水环境,水深3 cm，平台在水面以上1 cm，于平台以上14 cm 处放笼罩，上面放水和食物。水温和室温保持在25 C，每日换水并打扫实验箱。REMSD 组大鼠在小台上屈曲而立，在快动眼睡眠(rapid eye movement sleep， REMS) 时，由于伴随全身肌肉松弛和节律性垂头，大鼠落入水中而惊醒，再爬上站台。用此方法自18:00开始连续剥夺大鼠的REMS至相应实验时间点。

 旷场实验( open field test， OFT )

实验装置为高60 cm、 底面边长100 cm、内壁涂黑的无盖方箱，底面平均分为25个小方格，正上方2 m处架一摄像机，镜头对准箱底，实验在安静环境下进行，大鼠置于方箱底面中心，同时进行摄像和计时，3 min 后停止摄像,更换动物后，继续进行实验。2次实验之间清洗箱壁及底面，以免上次动物余留的信息影响下次实验结果。计分方法:通过放像设备，观察大鼠3 min内越过的格子数为水平得分，后肢站立次数为垂直得分，两者之和为OFT总得分。REMSD实验前后均进行旷场实验。

小鼠膀胱ai原位瘤动物模型建立方法

膀胱灌注法通常采用对数生长期的MB49小鼠膀胱ai细胞株作为实验材料，6-12周龄的雌性C57/BL6小鼠作为实验动物。- -般膀胱内灌注数量为:10^4-5*10^5个，10^4-10^5个， .5x10^6-4x10^6个。实验中常通过导管对经过膜处理后膀胱灌入细胞悬液--定时间后使细胞粘附于膀胱壁上，建立起小鼠原位膀胱ai模型。该方法简便有效，成瘤率相对较高。但是在膀胱粘膜完整的情况下，发癌率- -般只有10%。为提高其移植成功率，研究者通常采用膀胱粘膜损伤技术进行膀胱灌注。常用的膀胱损伤技术有电灼法，酸性溶液和胰蛋白酶灌注法(17-19)。该方法成瘤率高，具有很强的实用性，但是膀胱ai模型插管要求高，肿liu细胞容易外渗，并且膜损伤处理过后易发生膀胱内发炎现象。

4种肺动脉高压(PH)动物模型肺血管重构模式的差异

方法:雄性SD大鼠(350-400g),分别通过腹主动脉-腔静脉分流(A-VF,n=10)、左肺切除(PE,n=10)、野百合碱注射(MCT,n=10)、左肺切除+MCT(PE+MCT,n=12)4种方法建立PH模型.检测平均肺动脉压力(m***)、RV/(LV+S)重量比值、肺小动脉中膜厚度百分比(WT%)、无肌性动脉肌化程度和新生内膜(neointima)形成、新生内膜增殖度和血管阻塞计分(VOS).

结果:在PE+MCT组(肺切除术后5周,MCT注射后4周)右肺腺泡内血管出现了新生内膜病变,其它组均没有新生内膜病变形成.PE+MCT组的动物出现了严重的右心室肥大,动脉中膜明显增厚,平均肺动脉压(m***)和无肌性血管肌化程度显著增加;A-VF、PE和MCT组仅形成轻-中度的右心室肥大、m***升高和小动脉肌化.结论:左肺切除联合应用MCT能成功诱导大鼠PH新生内膜模型,该模型能更好地模拟人类严重PH的病理改变,是研究梗阻性PH更为适用的动物模型.