南京小鼠肝部分切除模型DNA水平“本信息长期有效”

消化系统运动实验

　　1．动物离体标本实验消化道平滑肌具有肌源性运动的特点，动物离体的肠段、胆囊、乃至胃肠肌片，只要具有合适的存活环境就可保持其运动机能。这是药理学研究中常用的一种离体 实验方法 ，这具有实验条件较易控制、操作较简单、用一般仪器设备即能工作等优点，从而应用较广。

标本制备大都选用兔、豚鼠、大白鼠等动物的组织，也可利用手术中取下或猝死剖检时取下的消化道进行实验。

　　取禁食24小时的动物，通常用击头致毙法处死，以避免或等对胃肠运动机能的影响。立即常规剖腹，取出所需的胃、肠、胆囊等，去除附着的系膜或脂肪等组织。迅速放在充氧（或含5%CO 2 ）、保温（37℃）的保温液中，并以用保温液将管腔内的食物残渣洗净。操作时动作要轻柔，冲洗时不宜采取高压以组织挛缩。

?急性肝功能衰竭模型

A.腹腔注射法:采用Wistar 或SD大鼠，重200+10g,约20只大鼠。实验组:用四氯化tanCCI4)溶于精致植物油，配成浓度为10%、

20%或更高40%的四氯化tan，予3-10ml/kg分组腹腔注射给药，12~24h (更早或更晚)后处死动物。取材，检测指标。对照组:予相同剂量的精致植物油腹腔注射，余同上。

(1)血液:测定xue清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红质(TB)、总蛋白(TP)、白蛋白(A)血qing等。

a. 肝组织样品处理血qing:以3500 转/分离心15~20min,取上清夜低温保存，于一周内检测完.b. 肝样:取011g加1mL生理盐水匀浆，以3500转/分离心15~ 20min 取上清夜低温保存，于一周内检测完.

(2)组织病理学检查

取材: a.时间:分组给药后3h、6h、12h、 24h。

b.固定:取gan脏将其固定于4 % ( 10%)甲

醛中，经常规脱水，石蜡包埋，切5um厚切片，常规HE染色、Masson染色和Ret2culin染色，光镜下观察。

肝硬hua模型

选体重150-200g的Wistar大鼠，将D-氨基半乳糖配制成10%的生理盐水溶液，用1NNaOH将pH调节至7.0,以250mg/kg的剂量行腹内注射，每天一次，每周6天，约半年左右即可形成肝硬hua。

在复zhi过程中，自股动脉取血作肝功能试验，包括xue清蛋白测定、浊度试验、转氨酶、乳酸脱氢酶（LDH）、单胺氧化酶(MAO)、5'-核苷酸酶(5'-NA)、γ-谷氨酰转肽酶(γ－GT)及dan碱酯酶。分批处死动物进行尸解，观察腹shui，心、gan、脾、肺shen等器guan形态,用4%甲醛溶液固定,石蜡包埋,切片厚5微米,进行HE、网状纤维（Gordon与Sweet法)、胶原纤维（Van Gieson 法)及弹力纤维(Weiger法)染色。

在采用上述剂量D-氨基半乳糖长期多次注入大鼠腹腔时，动物耐受性较好。逐渐出现进食活动减少，有时解稀糖大便，腹部较为膨隆。半年内与对照组相比，实验组体重平均增长显著延缓。

肝部分切除模型

       60只成年SPF级C57BL/6J小鼠随机分3组.A组小鼠称量体质量,全肝质量及各肝叶质量,计算全肝质量/体质量比,70%和90%肝比例.采用直视下分步单纯丝线结扎肝解剖功能单位后再切除肝叶的方法,B组行70%肝切除;C组行90%肝切除.观察术后动物生存情况.结果小鼠全肝质量为(1.325±0.029)g,体质量为(26.5±1.14)g,左外侧叶质量为(0.433±0.041)g,中叶为(0.411±0.035)g,右前叶为(0.140±0.011)g,右后叶为(0.175±0.015)g,尾状叶为(0.099±0.006)g,全肝质量/体质量比为(4.92±0.13)%.肝左外侧叶与中叶之和约占全肝比重的70%;仅剩余尾状叶则切除肝比重约为90%.B组和C组手术成功率为100%,B组术后1周动物存活率为100%,C组术后1 d存活率为30%(6/20),2 d存活率为0.