南京动物慢性肺阻塞模型蛋白水平 英瀚斯生物科技

呼吸系统疾病动物模型

肺水模肿型

用氧化氮吸入可造成大鼠和小鼠性，或用气管内注入50%葡萄糖液（家兔及狗分别为1及10ml）引起渗透性。下用37～38℃生理盐水注入兔颈外静脉或股静脉使血液总量增加0.6～1倍（血液总量相当体重1/12），可形成稀血性多血症。切断豚鼠、家兔、大鼠颈部两则迷走神经可引起。家兔（1.5～2kg）耳静脉注入1：10000.54～0.6毫克，可使动物发生并在5～15分钟，肺系数自4.1～5g/kg增至6.3～12.5g/kg；5mg肌注，8分钟左右大鼠，肺系数20g/kg，静脉注入10%（兔0.1ml/kg，狗0.5ml/kg）也可引起急性。腹腔注入6%氯化铵水溶液可引起大鼠（0.4ml/kg）、豚鼠（0.5～0.7ml/kg）。

呼吸系统包括鼻、咽、喉、气管、支气管和肺，是通气和换气的。通常以喉环状为界将呼吸道分为上、下两部分。下呼吸道从气管起，支气管经逐级分支到达肺泡。终末细支气管以上为传导部分，呼吸细支气管以下为换气部分。临床上，通常把管径＜2mm的小支气管和细支气管，称为小气道。传导性气道管壁覆盖纤毛柱状上皮，肺泡则由肺泡上皮覆盖。Ⅰ型肺泡细胞胞浆扁阔，覆盖90％以上的肺泡面积。Ⅰ型肺泡上皮细胞和内皮细胞及其基膜组成的肺泡膜（alveolocapillary membrane）构成血气屏障，是气血交换的场所。Ⅱ型肺泡细胞为数较少，呈立方形，镶嵌在Ⅰ型上皮细胞之间，能排泌肺表面活性物质。

呼吸系统观察实验

肺的显微结构

取兔和人肺切片（H－E染色）观察。辨别肺的传导部与呼吸部各段在结构上的不同特点及其相互移行的关系。

（一）低倍镜观察

可见很多大小不等的蜂窝状结构即肺泡。还可见各级支气管（小支气管、细支气管、终末细支气管、呼吸性细支气管）及其伴随的血管。在两肺泡之间的结缔组织为肺泡隔。寻找一个有呼吸性细支气管与肺泡管、肺泡囊、肺泡相连的部分，换高倍镜观察。

（二）高倍镜观察

1．小支气管管腔较大，腔面覆有假复层纤毛柱状上皮。在固有层与粘膜下层交界处有一不完整的环形平滑肌束。粘膜下层中有腺体。外膜中有数块。

2．细支气管 结构基本上与小支气管相似，只是管径较小，腺体与逐渐减少，但平滑肌有所增加。

3．终末细支气管 粘膜形成许多皱襞，因此管腔成星状。上皮为单层纤毛柱状上皮，无杯形细胞。腺体与已不存在。外面围有一薄层较完整的环形平滑肌层。

4．呼吸性支气管 它与终末细支气管的区别在于管壁已有肺泡出现，其管壁直接与肺泡或肺泡管相连。管壁上皮为单层柱状或立方上皮，甚至为单层扁平上皮。

5．肺泡管 是呼吸性细支气管的分支，由许多肺泡围成，所以它自身的管壁结构很少，管壁只存在于相邻肺泡开口之间的部分。此处上皮细胞为立方形或扁平形。上皮下含少量结缔组织和平滑肌纤维。其结构特点是肺泡隔边缘部形成结节状膨大。

6．肺泡囊 为数个肺泡共同开口形成的囊腔。结构与肺泡管相似，但在肺泡开口处无平滑肌纤维，故肺泡隔末端无明显的膨大。

致病机理：

四氯化tan在肝细胞内经CYP2E1代谢产生的自由基可以损伤细胞膜，从而破坏肝细胞的结构和功能，造成肝细胞坏死。同时，肝zang内的星型细胞会活化，释放Ⅳ型胶原酶，降解ⅳ型胶原，合成分泌ⅰ型胶原，而引起胶原沉积和肝纤维化。

动物准备：

雄性的BALB / c小鼠10周龄（BALB / C比C57敏感，造模成功率更高）或SD大鼠（雄性200克左右）等，橄榄油，si氯化碳，注she器，电子天平。

实验步骤：

1、配制si氯化碳溶液，si氯化碳与橄榄油按照体积比1：4混匀，备用。

2、按小鼠体重0.5μl/ g CCl4（2.5μlCCl4橄榄油溶液）腹腔注she，每周2次，持续6周。空白对照组仅注射橄榄油2.5μl/ g。

3、在连续给CCl4 2周后，可随机抽取对照组和造模组小鼠各3只，检测ALT，AST，TBL以及切片等是否造模成功。

如图4所示，若模型成功，即可进行yao物评价，继续处理4周后，即可处死小鼠，检测肝纤维化相关的标记，评价yao物效果。