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发布时间:2022-09-07 14:20:00 作者:英瀚斯
病理实验外包,病理染色方法分为石蜡切片法和冰冻切片两种,详细的实验方法如下:石蜡切片法实验方法及原理:石蜡切片是基本的切片技术,冰冻切片和超薄切片等都是在石蜡切片基础上发展起来的。素与伊红对比染色法(简称H.E.对染法)是组织切片常用的染色方法。这种方法适用范围广泛,对组织细胞的各种成分都可着色,便于观察组织构造,而且适用于各种固定液固定的材料,染色后不易褪色可长期保存。因此组织切片经HE染色后,细胞核被素染成蓝紫色,细胞质、肌纤维、胶原纤维则呈现出不同程度的红色。冰冻切片试验方法及原理:冰冻切片是指将组织在冷冻状态下直接用切片机切片。它实际上是以水为包埋剂,将组织进行冰冻至坚硬后切片的。在冰冻切片前组织不经过任何化学药品处理或加热过程,大大缩短了制片时间。同时,由于此法不需要经过脱水、透明和浸蜡等步骤,因而较适合于脂肪、神经组织和一些组织化学的制片,并作为快速切片的方法应用在临床诊断。
病理实验外包,冰冻切片取样实验步骤:一、 取材应尽可能快地采取新鲜的材料,防止组织发生死后变化。二、速冻1. 将组织块平放于软塑瓶盖或小盒内(直径约2 cm)。2. 如组织块小可适量加OCT包埋剂浸没组织,然后将小盒缓缓平放入盛有液氮的小杯内。3. 当盒底部接触液氮时即开始气化沸腾,此时小盒保持原位切勿浸入液氮中,大约10~20 s组织即迅速冰结成块。病理染色-尼氏染色大鼠脑海马区域尼氏染色尼氏染色可清晰的显示出尼氏小体定位,判断神经细胞是否受损。4 在制成冻块后,即可置入恒冷箱切片机冰冻切片。5. 若需要保存,应快速以铝箔或塑料薄膜封包,立即置入-80℃冰箱贮存备用。三、固定1. 样品托上涂一层OCT包埋胶,将速冻组织置于其上,4℃冰箱预冷5~10 min 让OCT胶浸透组织。2. 取下组织置于锡箔或者玻片上,样品托速冻。3. 组织置于样品托上,其上再添一层OCT胶,以完全覆盖为宜,速冻架(PE)上30 min。
病理实验外包,病理染色常见染色介绍油红O染色:油红O脂肪染色法是指在日常病理诊断和科研工作中为了显示组织内的脂肪常采用油红O进行染色的方法,油红O为脂溶性染料,在脂肪内能高度溶解,可特异性的使组织内甘油三酯等中性脂肪着色。显微染色剂,神经组织的染色,植物细胞学中染色体染色和检定颠茄碱的试剂。肝细胞内的脂肪滴呈红色,细胞核呈蓝色1.标本 人或动物的肝组织等,甲醛—钙液固定,冰冻切片,厚10μm。
2. 改良的油红O染色液 油红O 0. 5g, 50%乙醇100ml。将油红O溶于乙醇内,且不断搅拌至完全溶解即可。配制好的染液置磨口瓶内保存备用。
3. 染色步骤 ①切片干燥后入50%乙醇稍洗;②油红O乙醇染液作用8min;③50%乙醇分化,自来水终止分化;④素复染核,自来水返蓝,甘油明胶封片。
病理实验外包,病理染色常见染色介绍扫描电镜检测:扫描电子显微镜的制造是依据电子与物质的相互作用。当一束高能的人射电子轰击物质表面时,被激发的区域将产生二次电子、俄歇电子、特征x射线和连续谱X射线、背散射电子、透射电子,以及在可见、紫外、红外光区域产生的电磁辐射。同时,也可产生电子-空穴对、晶格振动 (声子)、电子振荡 (等离子体)。原则上讲,利用电子和物质的相互作用,可以获取被测样品本身的各种物理、化学性质的信息,如形貌、组成、晶体结构、电子结构和内部电场或磁场等等。扫描电镜扫描电镜是介于透射电镜和光学显微镜之间的一种微观形貌观察手段,利用极狭窄的电子束去扫描样品,通过电子束与样品的相互作用产生各种效应从而微观成像,其成像富有立体感,利用扫描电镜我们可直接观察各种样品表面的细微结构。扫描电子显微镜 (scanning electron microscope, SEM) 是一种用于高分辨率微区形貌分析的大型精密仪器。具有景深大、分辨率高, 成像直观、立体感强、放大倍数范围宽以及待测样品可在三维空间内进行旋转和倾斜等特点。另外具有可测样品种类丰富, 几乎不损伤和污染原始样品以及可同时获得形貌、结构、成分和结晶学信息等优点。南京英瀚斯,病理染色实验服务平台。
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