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发布时间:2022-09-01 10:01:00 作者:英瀚斯
动物模型的设计原则
相似性
在动物身上人类疾病模型。操作时要小心仔细、大胆敏捷、熟练准确、不能粗暴,不能恐吓动物,同时,要爱惜动物,使动物少受痛苦。目的在于从中找出可以推广(外推)应用于的有关规律。外推法( Extrapolation )要冒风险,因为动物与人到底不是一种生物。例如在动物身上无效的不等于临床无效,反之也然。因此,设计动物疾病模型的一个重要原则是,所的模型应尽可能近似于人类疾病的情况。
能够找到与人类疾病相同的动物自发性疾病当然。例如日本人找到的大白鼠原发性就是研究人类原发性的理想模型,老母猪自发性冠状动脉粥样硬化是研究人类的理想模型;自发性狗类性与人类幼年型类性十分相似,也是一种理想模型,等等。
1 被动吸烟模型
(1)方法 实验豚鼠(雌雄不限),将豚鼠置放在封闭的通气隔离包中,每天暴露在xiang烟烟雾环境中(10支/次,1次/d,5d/周,连续1, 3, 6, 12个月作肺组织病理学及肺功能检查),即可建立模拟人类吸烟引起的动物模型。
(2)模型特点 本模型病理表现 为进行性肺泡腔扩大、肺功能减退,造模12个月后即使停止给予动物烟雾暴露环境,模型动物肺泡腔的病理学改变仍可呈进行性发展,不能恢复正常。因此,模型实验结论的正确性只是相对的,终必须在人体身上得到验证。模型动物出现的百分比、病变轻重程度与吸烟时间密切相关;因模型时间较长,实验过程中影响因素较多,模型的稳定性相对较差。
2 蛋白酶模型
(1)方法 成年大鼠(雌雄不限),经yi醚后仰卧固定头部及四肢,轻拉鼠舌,压迫舌腹,在额镜直视下,趁大鼠呼吸瞬间,迅速将已装有木瓜蛋白酶溶液连有的细塑料插管插入达气管分叉处,随后慢慢推入木瓜蛋白酶(2mg/kg体重)溶液,注入溶液体积控制在0.2ml/100g体重或以下。正确地评估动物疾病模型应该懂得没有一种动物模型能完***疾病真实情况,动物毕竟不是人体的缩影。滴完溶液后,可辅助大鼠作各种直立、旋转等动作,以便所滴溶液在大鼠肺内均匀分布,然后大鼠自由饮水进食。
(2)模型特点 大鼠在造模4d后开始出现一系列的渐进理变化,肺功能检查模型大鼠第4日时的胸腔气体容积(TGV)值增加65%,而到第8日就不再变化,而造模前后大鼠气道阻力(Raw)值则变化无显著性差异。造模后4d,以TUNEL法检测大鼠视网mo和视神经细胞凋亡,造模后7d,RT-PCR、Western-blot检测视wang膜和视神经节细胞组织Caspase-3、BCL-2基因和蛋白表达。病理组织学检查模型大鼠在发生早期(1周以内)主要是肺泡上皮细胞发生了破坏,而在晚期阶段则可见Ⅱ型肺泡上皮细胞增多,以及肺泡间隔内局限性胶原纤维及弹性纤维的聚集。但本模型(犬)在测定肺功能时表明,动物呼气流速的下降与静态顺应性的下降不成比例,同时病理组织学也证实动物气道萎缩,气道病变说明本模型不是单纯性的较佳模型。
piao呤霉1素氨基核苷模型
piao呤霉1素氨基核苷( puromycin aminonuclcoside , PAN)大鼠模型是研究微小病变shen病( minimal change nephrotic syndrome,MCNS)和局灶节段性shen小球硬化( focal segmental glomenuloscle-rosis ,FSGS)病理损害的理想实验动物模型,该模型主要的临床特征为大量蛋bai尿。抑yu症应激动物模型(一)行为绝望模型行为绝望模型具有简单、快速、敏感等特点,常用于抗抑郁yao物的快速筛选。对于PAN导致shen脏损害的机制目前尚不十分清楚,然而,人们通过细胞培养和动物实验对其发生h发展机制进行不断的深人研究,也取得了可喜的成果。
前lie腺素E2对大鼠巨噬细胞株NR8383 合成血管内皮生长因子促进人脐静脉血管内皮细胞成管、迁移的影响
方法:分别采用0.1 nmol/L PGE2、1 nmol/L PGE2、1 nmol/L PGE2+10 nmol/L EP2受体抑zhi剂AH6809+10 nmol/L EP4受体抑zhi剂AH23848 处理的NR8383 细胞作为各实验组,选择未经PGE2以及其特异性受体抑zhi剂处理的NR8383 细胞作为对照组,采用Western blot 和qPCR方法检测各组NR8383细胞内V***蛋白以及mRNA的表达水平;收集以上各处理组的细胞培养上清液分别刺激1HUVECs,运用TRANSWELL 小室、Matrigel 胶细胞成管实验等实验方法,观察PGE2调控巨噬细胞对HUVEC 迁移效应和成管能力的影响。该饲料用酪蛋白或大豆作为蛋白来源,另加蔗糖、猪油、维生素粉、盐和定量的L-胱酸而组成。
结果:随着NR8383 细胞培养液中加入PGE2浓度增gao,其 V***蛋白表达和V*** mRNA的表达水平显著升高(P<0.05);0.1 nmol/L、1 nmol/L PGE2处理过的NR8383细胞培养上清液可以显著增加HUVEC细胞形成的小管面积,形成小管面积随着PGE2处理浓度的增加而增加(P<0.05);HUVECs的迁移运动也随着PGE2处理浓度的升高不同程度的增强,HUVECs趋化的数量显著升高(P<0.05);研究发现PGE2特异性的EP2/EP4 受体拮抗剂AH6809/AH23848,可以显著抑制PGE2 增强NR8383 细胞内V*** mRNAs 表达的作用并且也显著抑制PGE2 增强 NR8383细胞促进HUVECs成管和趋化能力的效应(P<0.05)。实验动物大、小鼠的采血方法1、动物实验中剪尾采血:需血量少时可用此方法。
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