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实验动物各种体液、的采集方法

消化液的采集

(一) 唾液

1. 直接抽取法 在急性实验中， 可用吸管直接插入动物口腔或唾液腺导管抽吸唾液，此法非常简单，但从口腔抽吸唾液会有杂质混入。

2. 制造腮腺瘘法 在慢性实验中,收集狗的唾液，要用手术方法将腮腺导管开口移向体外，即以腮腺导管为中心，切成一直径约2～3cm的圆形粘膜片，将此粘膜片，与周围组织分开，穿过皮肤切口引到颊外,将带有导管开口的粘膜片与周围的皮肤缝合,腮腺分泌的唾液就流出颊外。这种方法可以收集到较纯净的唾液。②脱氢表雄酮造模法：选23d龄幼年雌性大鼠，按6mg/100g体重的剂量每天经皮注射脱氢表雄酮，连续20d。

(二)胃液

1. 直接收集胃液法 急性实验时，先将动物，将插胃管经口插入胃内,在灌胃管的出口连一，用此可收集到胃液,此法适用于狗等大型动物。如是大鼠,需手术剖腹，从幽门端向胃内插入一塑料管，再由口腔经食道将一塑料管插入前胃，用pH7.5、35℃左右的生理盐水，以12ml/h的流速灌胃，收集流出液，进行分析。大鼠后眼框静脉丛取血方法4、动物实验中颈静脉或颈动脉采血：将鼠，剪去一侧颈部外侧被毛，作颈静脉或颈动脉分离手术，用即可抽出所需血量。

2. 制备胃瘘法 在慢性实验中,收集胃液多用胃瘘法,如全胃瘘法、巴氏小胃瘘法、海氏小胃瘘法等。制备小胃是将动物的胃分离出一小部分，缝合起来形成小胃，主胃与小胃互不相通，主胃进行正常消化，从小胃可收集到纯净的胃液。应用该法，可以待动物恢复健康后，在动物清醒状态下反复采集胃液。d-17d可以成功制作改良尼古J依赖戒断大鼠模型,尼古J戒断后大鼠疼痛敏感性加高。

(三)胰液和胆汁

在动物实验中，主要是通过对胰总管和胆总管的插管而获得胰液或胆汁。狗的胰总管开口于十二指肠降部，在紧靠肠壁处切开胰管，结扎固定并与导管相连，即可见无色的胰液流入导管。大鼠的胰管与胆管汇集于一个总管，在其入肠处插管固定，并在近肝门处结扎和另行插管，可分别收集到胰液和胆汁。因此要求研究者懂得，各种动物所需的诱发剂量、宿主年龄、性别和遗传性状等对实验的影响，以及动物疾病在组织学、生化学、病理学等方面与人类疾病之间的差异。

有时也可通过制备胰瘘和胆囊瘘来获得胰液和胆汁。

实验动物科学诞生于本世纪五十年代初期，现在已发展成为一门独立的、综合性的基础科学，它是融合 生物 学、动物学、兽医学和医学等科学，并引用了其它自然科学的成就发展起来的。因此这门科学是综合性的，它所涉及到的知识面很广泛，它所包括的内容极为丰富，其中不仅要以 生物 学、医学、药学、兽医学、畜牧学等为对象，以遗传学、育种学、病理学、生理学、营养学、微生物学等为基础，还要引用机械工程学、环境卫生学、建筑学等科学，对实验动物和动物实验方法进行开发和研究。因此，设计动物疾病模型的一个重要原则是，所的模型应尽可能近似于人类疾病的情况。

脓毒症模型

脓毒症模型方法及原理

一般构建脓毒症模型有多种方式，例如细菌攻击、内毒su攻击、腹膜炎攻击等，针对小鼠较为经典的方法为盲肠jie扎穿刺（CLP）。此方法属于腹膜炎攻击方法的一种，主要是通过手术方式将小鼠自身盲肠内容物释放到腹腔造成gan染，从而模拟脓毒症的发生和发展。在灌注MB49膀胱ai细胞前，其中A组不进行预处理,B、C、D和E组则对膀胱粘膜进行预处理。

实验方法

Step1：常规方法ma醉小鼠，剔除腹部毛发，酒精消毒

Step2：腹部正中开口，逐层打开皮肤和腹膜，暴露盲肠

Step3：使用锐器刺穿盲肠尾部1/2位置，挤出内容物

Step4：放置引流物，时盲肠内容物可持续流出

Step5：逐层缝合皮肤，碘伏消毒，将小鼠放回笼内饲养

小鼠膀胱ai原位瘤动物模型建立方法

膀胱灌注法通常采用对数生长期的MB49小鼠膀胱ai细胞株作为实验材料，6-12周龄的雌性C57/BL6小鼠作为实验动物。- -般膀胱内灌注数量为:10^4-5*10^5个，10^4-10^5个， .5x10^6-4x10^6个。实验中常通过导管对经过膜处理后膀胱灌入细胞悬液--定时间后使细胞粘附于膀胱壁上，建立起小鼠原位膀胱ai模型。该方法简便有效，成瘤率相对较高。但是在膀胱粘膜完整的情况下，发癌率- -般只有10%。为提高其移植成功率，研究者通常采用膀胱粘膜损伤技术进行膀胱灌注。常用的膀胱损伤技术有电灼法，酸性溶液和胰蛋白酶灌注法(17-19)。打号前用蘸有酒精的棉球擦净耳朵，用耳号钳刺上号码，然后在烙印部位用棉球蘸上溶在食醋里的黑墨水擦抹。该方法成瘤率高，具有很强的实用性，但是膀胱ai模型插管要求高，肿liu细胞容易外渗，并且膜损伤处理过后易发生膀胱内发炎现象。