南充医学实验外包***「英瀚斯」

大鼠脑缺血再灌注模型

造模方法

大鼠麻zui仰卧固定于恒温手术台上。(2)模型特点大鼠在造模4d后开始出现一系列的渐进理变化，肺功能检查模型大鼠第4日时的胸腔气体容积(TGV)值增加65％，而到第8日就不再变化，而造模前后大鼠气道阻力(Raw)值则变化无显著性差异。暴露颈总动脉颈（CCA），分离颈内动脉（ICA）和颈外动脉（ECA）。CCA近心端结扎并另备线，ICA远端放置微型动脉夹，在CCA靠近分叉处插入鱼线，即线栓由颈内动脉分叉处计长度为1.85±0.05cm，说明丝线头端己到达ICA分支MCA以和大脑前动脉（ACA）的分叉处，阻断了同侧ICA和经ACA来自对侧ICA的血供，缺血1h。

手术造模图片

病理判定图片

动物模型设计的注意事项

注意模型要尽可能再现所要求的人类疾病

模型时必须强调从研究目的出发，熟悉诱发条件、宿主特征、疾病表现和发病机理，即充分了解所需动物模型的全部信息，分析是否能得到预期的结果。例如诱发动脉粥样硬化时，草食类动物兔需要的胆固醇剂量比人高得多，而且病变部位并不出现在主动脉弓。D组灌注后di1天开始给予PBS膀胱灌注,每隔3dl次,连续6次。病理表现为纤维组织和平滑肌为主，可有大量泡沫样细胞形成斑块，这与人类的情况差距较大。因此要求研究者懂得，各种动物所需的诱发剂量、宿主年龄、性别和遗传性状等对实验的影响，以及动物疾病在组织学、生化学、病理学等方面与人类疾病之间的差异。要避免选用与人类对应相似性很小的动物疾病作为模型材料。为了增加所动物疾病模型与人类疾病的相似性，应尽量选用各种敏感动物与人类疾病相应的动物模型，可参考相关文章《各种敏感动物与人类相似的疾病模型》。

膀胱结shi动物模型

(1)方法  体重55～60g的幼龄大鼠，单笼饲养。丙泊酚干预对大鼠视神经损伤的影响方法：SD大鼠67只，随机取20只为正常组，不予任何处理。标准大鼠饲料中加入5％的苯二甲酸(terephthalic acid,  TPA)，用此实验饲料喂养大鼠，连续14d，大鼠自由饮水。造模第十四日时，动物用戊ba比妥钠ma醉后手术取出膀胱，将其置放于10％甲醛溶液固定，作常规组织切片，HE染色及 Von Kossa氏钙显示法染色，光镜下观察。

(2)特点  用含5％TPA饲料喂养14d后，模型大鼠膀胱腔内均含有大小不等、数量不一的钙化小体，钙化小体周围被一层厚薄不一均质状的物质所包裹，小体内的黑色钙盐呈分布不均的颗粒状，有的可聚集成团块状。例如用一次定量放血法可造成出血，会si亡，这就符合可重复性和达到了标准化要求。本模型制作方法简便，造模时间短，模型成功率，重复性好。

1.2 实验方法优势

这种实验方法相对于被动回避（穿梭实验、避暗实验）等实验的优点在于：这种迷宫利用了啮齿类动物对新异环境天然探究的自然习性，不需要动物学习任何规则来趋利避害，能够有效地反映出动物对新异环境的识别记忆能力。

2、电刺激Y迷宫测试原理

 该测试方法更多的应用于检测实验动物空间辨别的学习记忆能力。

2.1 电刺激Y迷宫使用方法

Y 迷宫由3 个相同的臂组成,分别称为Ⅰ区、Ⅱ区、Ⅲ区。通常把下臂( Ⅰ臂)定为起步区,左侧( Ⅱ臂) 为安全区,右侧( Ⅲ臂) 为区,三臂相交处为隔离区(0 区) 。迷宫底铺以铜棒,可以通电刺激。制备小胃是将动物的胃分离出一小部分，缝合起来形成小胃，主胃与小胃互不相通，主胃进行正常消化，从小胃可收集到纯净的胃液。三臂顶端各装有15W 的信号灯。实验前先将大鼠放入迷宫,让其适应5 min ,训练组大鼠在起步区予以致其逃至安全区,灯光持续15 s ,然后熄灯休息45 s ,开始下一次操作。每次实验在每只大鼠上重复20 次为一轮。实验在黑暗、安静的环境中进行。凡大鼠受后10 s 内一次性从起步区逃至安全区的反应称为“正确反应”,否则为“错误反应”。以连续10 次中正确反应达9 次或以上定为学会标准。达到学会标准所需的次数表示学习记忆成绩,次数少说明学习能力强。