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发布时间:2022-07-08 15:32:00 作者:英瀚斯
大鼠肺纤维化模型
肺纤维化的病理特点为肺部引起肺泡反复持续性损伤及细胞外基质的破坏、修复和过度沉积。该病严重影响患者生存质量,预后极差。病理染色-番红-固绿鼠膝关节番红-固绿染色番红-固绿染色法的染色原理在于嗜碱性的与碱性染料番红O结合呈现红色,嗜酸性的骨和酸性染料固绿结合而成蓝色,与呈现红色的对比鲜明,从而将组织和骨组织区分开。由于该病发病机制到目前为止尚不清楚,临床上也缺乏相应的有效手段,患者病死率居高不下,因此建立一个可靠稳定的肺纤维化动物模型是探索其发病机制和开发有效的重要前提,实验中常用的肺纤维化诱导剂主要有、、二氧化硅、石棉、线、呼肠病毒、野百合碱等,在这些诱导剂中,以使用为广泛,己成为经典的动物肺纤维化模型的诱导剂。
病理实验外包,染色常见染色介绍天狼星红染色:主要由天狼星红染色液、Mayer 素染色液组成,主要用 于各种组织病变时对胶原纤维异常或纤维的研究中,在普通光学显微镜下心脏血管等组 织的胶原纤维被染成红色,在偏振光镜下对各种纤维化病变的分型和分级研究有一定的帮助 作用。由于电子易散射或被物体吸收,故穿透力低,必须制备超薄切片(通常为50-100nm)。采用组化技术也可显示Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维,但所用昂贵,操作费时,而采用 天狼星红染色试剂便宜,操作简单。
天狼星红染色液操作步骤
1、组织固定于 10%固定液,常规脱水包埋。
2、切片厚 6μm,常规脱蜡至水。
3、天狼星红染色液滴染 1h。
4、流水稍冲洗,去除切片表面染液。
5、Mayer 素染色液染细胞核 8~10min。
6、流水冲洗 10min。
7、常规脱水透明,中性树胶封固。 天狼星红染色可用作肝纤维化以及纤维化模型的定性与胶原纤维沉积的半定量分析。南京英瀚斯,的病理染色实验服务平台。
病理实验外包,病理染色切片常见问题及解决方法:1.切片碎烂或组织脱出并与石蜡分离
●原因:①组织脱水,透明不够。②浸蜡时间过长、浸蜡温度过高。③组织脱出是由于脱水、透明时间不够,或组织中含有乙醇等,石蜡不易渗入组织中故导致石蜡与组织分离。④二使用时间过久。
●解决方法:①必须按组织大小厚薄选择脱水、透明时间。②依组织的性质和结构特点确定浸蜡时间、控制包埋温度。一般这种情况难以补救。③脱水,透明渗蜡不够,应重新熔化,退回入二和酒精,再进行渗蜡包埋。④更换二。
2.切片皱褶太多且不能完全展开
●原因:①石蜡太软或室温过高。②切片刀上粘有残余的石蜡,刀口不干净。③组织浸蜡时间不够或脱水、透明不够。④切片刀不锋利。
●解决方法:①可将蜡块放入冰箱中冰冻后切片。并在切片时一边切片一边用冰块冰冻或换蜡。如室温过高,可开空调降低室温。英瀚斯(东极)生物始终提供高质量的医学科研外包服务,我们已经与来自***各地几百家医院、企业及科研院所建立了长期的合作关系。②切片刀不干净,可用棉花沾少许二将刀口拭干净。③组织浸蜡不够,可重复浸蜡过程。④将切片刀磨锐利再行切片。南京英瀚斯,病理染色实验服务平台。
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