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发布时间:2022-05-17 03:16:00 作者:英瀚斯
病理实验外包,病理染色多聚甲醛保存组织的注意事项:
多聚甲醛放置过久其中的醛基可能会被氧化为酸,使溶液pH降低,从而影响染色。
不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同,应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。
多聚甲醛虽然作用温和,但能硬化组织,固定时间过久会导致组织变脆,切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过24小时。
多聚甲醛可长期存在于固定过的细胞或组织样品中,固定完成后用适当的洗涤液或水冲洗数小时仍会有残留,因此后续实验结果如果受醛基影响,须尽量洗去残留的多聚甲醛。
醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧,使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或完全掩盖某些抗原决定簇,使之不能充分暴露,可造成假阴性的染色,影响组化结果。因此,4%多聚甲醛固定的细胞或组织样品在进行组化检测时,有时需要对抗原***行修复,然后才能进行染色等后续操作。天狼星红染色可用作肝纤维化以及纤维化模型的定性与胶原纤维沉积的半定量分析。
病理实验外包,病理染色骨组织的处理方式:组织里存有钙盐可妨碍用常规方法制作良好切片。骨组织及钙化病灶,经过固定后,需要先将钙盐除去使组织软化,才能进行常规切片。如果脱钙不全,则切片容易撕开或碎裂,损伤切片刀刀刃。脱去钙盐的过程,称为脱钙。骨组织固定24小时后,锯下不超过0.5cm厚的薄骨片,以4%甲醛溶液固定后,进行脱钙。骨组织过厚则需延长脱钙时间,但长时间浸于强酸会影响切片染色效果。在判断含铁血黄素沉积时,用Perls反应可以得到证实,该染色方法可以很好的区分含铁血黄素和其他色素。
取材骨组织固定于10%甲醛溶液24小时后再锯取厚度约0.5cm骨片
固定
以10%甲醛溶液固定2天
脱钙
将组织置于脱钙剂中,每日更换新鲜液,直至组织软化为止
除酸
流水冲洗24小时
脱水、浸蜡、切片
进行常规脱水、透明、浸蜡、切片 南京英瀚斯,病理染色实验服务平台。
病理实验外包,病理染色HE染色:在组织病理学中,素-伊红染色是一种日常使用的常规染色方法。常规素染色的对比染色是用伊红,也有采用焰红,因为焰红比伊红色泽更鲜明,还有采用橘黄G,比布里希猩红,波尔多红等作为对比染色。伊红是的胞质染料,本身溶于醇而不溶于水,为砖红色粉末状或酱红色结晶。配方:伊红Y(水溶)0.5-1g,蒸馏水99ml。如果取用伊红Y(醇溶性)应当溶于99ml 75%或95%的乙醇中。如果在伊红液中加入0.5ml冰醋酸,可以加速其染色过程,使得胞质的色泽更加艳丽。结果是细胞核呈蓝色,胞质、肌肉、结缔组织、红细胞和嗜伊红颗粒呈不同程度的红色。钙盐和各种微生物也可染成蓝色或紫蓝色。肺纤维化的病理特点为肺部引起肺泡反复持续性损伤及细胞外基质的破坏、修复和过度沉积。
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