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 病理实验外包，石蜡组织脱水注意事项1.  脱水必须在有盖的玻璃品中进行，防止吸收空气中的水分。2.  在更换高一级的脱水剂时，好不要移动材料以免损坏，可用吸管吸出器皿中的脱水剂，再用吸水吸尽器皿内剩余液，然后于皿中加入高一级脱水剂。3.  在低浓度酒精中，每级停留不宜太长，否则易使组织变软，助长材料的解体。4.  在高浓度或纯酒精中，每级停留的时间也不宜太长，否则会使组织变脆，影响切片。5.  如需过夜，应停留在70%酒精中。6.  脱水必须，否则不易透明，甚至使透明剂内出现白色混浊现象。实验～35天，大鼠自由饮用脱氧胆酸钠溶液，同时每隔5天以60％乙醇灌胃(10ml/kg)一次，第36～91天，每3天交替饮用脱氧胆酸钠或15％乙醇，同时每隔7天以60％乙醇灌胃一次。

 病理实验外包，病理染色常见染色介绍甲蓝染色：甲蓝（Toloniumchloride），是一种化合物，分子式为C28H20N2O10S2·2Na，分子量为656.62，甲蓝深绿色粉末，具古铜色光泽，易溶于水，呈蓝紫色溶液。微溶于醇呈蓝色，极微溶于，几乎不溶于醚。商品大部分为氯化锌复盐。主要用于氧化还原指示剂。用于检查缺陷和损伤部分，组织化学中用于测定脱氧核糖核酸和诊断。甲蓝是常用的人工合成染料的一种，属于醌染料类，这类染料一般含有两个发色团，一个是胺基，一个是醌型苯环，来构成色原显色。染料除有发色团外，还要有能使色原对组织及其他被染物产生亲和力的原子团即助色。助色团能促使染料产生电离成盐类，帮助发色团对组织产生染色力，使切片上的组织细胞着色。甲蓝不仅含有两个发色团，还含有两个助色团，为碱性染料，甲蓝中的阳离子有染色作用，组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。基质对甲蓝的异染性，是因为基质的主要成分是黏蛋白、多糖物质，而酸性硫酸根与嗜碱性染料有亲和力。由于荧光素所发的荧光可在荧光显微镜下检出，从而可对抗原进行细胞定位，并且可以通过荧光强度对检测蛋白的表达量进行半定量分析。

 病理实验外包，病理染色骨组织的处理方式：组织里存有钙盐可妨碍用常规方法制作良好切片。骨组织及钙化病灶，经过固定后，需要先将钙盐除去使组织软化，才能进行常规切片。如果脱钙不全，则切片容易撕开或碎裂，损伤切片刀刀刃。脱去钙盐的过程，称为脱钙。骨组织固定24小时后，锯下不超过0.5cm厚的薄骨片，以4%甲醛溶液固定后，进行脱钙。骨组织过厚则需延长脱钙时间，但长时间浸于强酸会影响切片染色效果。灌胃用60％乙醇是以15％氯化钠加无水乙醇配制而成，灌胃前恒温至55℃。

取材骨组织固定于10%甲醛溶液24小时后再锯取厚度约0.5cm骨片

固定

以10%甲醛溶液固定2天

脱钙

将组织置于脱钙剂中，每日更换新鲜液，直至组织软化为止

除酸

流水冲洗24小时

脱水、浸蜡、切片

进行常规脱水、透明、浸蜡、切片  南京英瀚斯，病理染色实验服务平台。

 病理实验外包，病理染色HE染色常见问题：Q1：HE染色常见的红蓝失调

答：

（1）偏蓝色：素染色过深，分化不够；伊红试剂过期；伊红染色时间太短，分化过度。

（2）偏红色：素染色过浅，分化过度；组织固定不佳，细胞核不着色；脱蜡不，素染不上；素氧化成熟不够；伊红染色过深，分化不足。

Q2：HE染色后出现的大白块或斑点

答：脱蜡前烤片温度偏低，时间过短，蜡未完全融化；切片在脱蜡溶剂中停留时间过短；脱蜡溶剂使用太久，得更新。